塑化劑的高效液相色譜HPLC檢測方案
 
【塑化劑】
        鄰苯二甲酸酯塑化劑是具些許芳香氣味或無氣味的無色液體，中等黏度、高穩定性、低揮發(fā)性、成(chéng)本低廉、低水溶解度 ,但易溶于多數有機溶劑中。在日常及工業上被(bèi)廣泛使用，以鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）爲大宗，占塑化劑産量的四分之三，其次是鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）。一般爲揮發(fā)性很低的粘稠液體。有特殊氣味，不溶于水，有毒。溶于大多有機溶液由鄰苯二甲酸酐與醇在酸(如硫酸)催化劑存在下酯化而成(chéng)。
 
【作用】
         塑化劑（Plasticizer），或稱增塑劑、可塑劑，是一種(zhǒng)增加材料的柔軟性或使材料液化的添加劑，也是環境雌激素中的酞酸酯類，其添加對(duì)象包含了塑膠、混凝土、幹壁材料、水泥與石膏等，同一種(zhǒng)塑化劑常常使用在不同的對(duì)象上，但其效果往往并不相同。塑化劑種(zhǒng)類繁多，但使用得普遍的即是一群稱爲鄰苯二甲酸酯類的化合物。據統計2004年全世界的塑化劑市場，總量約在550萬噸左右并朝600萬噸邁進(jìn)。2011年5月起(qǐ)台灣食品中先後(hòu)檢出DEHP、DINP、DNOP、DBP、DMP、DEP等6種(zhǒng)鄰苯二甲酸酯類塑化劑成(chéng)分，藥品中檢出DIDP；6月1日衛生部緊急發(fā)布公告，將(jiāng)鄰苯二甲酸酯類物質，列入食品中可能(néng)違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑名單；截止6月8日，台灣被(bèi)檢測出含塑化劑食品已達961項。
        塑化劑是大宗工業品，廣泛應用于國(guó)民經(jīng)濟各領域，包括塑料、橡膠、粘合劑、纖維素、樹脂、醫療器械、電纜等成(chéng)千上萬種(zhǒng)産品中。
        比如一般常使用的保鮮膜，一種(zhǒng)是無添加劑的PE(聚乙烯)材料，但其黏性較差；另一種(zhǒng)廣被(bèi)使用的是PVC(聚氯乙烯)保鮮膜，有大量的塑化劑，以讓PVC（聚氯乙烯）材質變得柔軟且增加黏度，非常适合生鮮食品的包裝。
    另一個廣泛存有塑化劑的産品是PVC制造的兒童玩具，歐盟已經(jīng)明定塑料玩具中塑化劑的含量需0.1%以下。
 
【樣(yàng)品處理過(guò)程】
        樣(yàng)品處理：稱取混勻試樣(yàng)1g（精确至0.0001g）于刻度玻璃試管中，加入甲醇定容至10mL，渦旋1min,加入氯化鈉2g，劇烈振蕩以分散樣(yàng)品，超聲提取10min，4000r/min離心10min，上清液過(guò)0.45μm有機濾膜，取濾液上機測定。必要時可以用甲醇稀釋後(hòu)進(jìn)行分析。
 
【色譜條件】
        色譜柱： C18反相色譜柱, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
        流動相:A相：水/乙腈=60/40  B相：甲醇/乙腈=60/40
        波長(cháng)：242nm  
        流速：1.0mL/min
        進(jìn)樣(yàng)量：20µL
        柱溫：30℃
 
【膠水樣(yàng)品譜圖】
  
【儀器配置】
 

4,4二溴聯苯的高效液相色譜HPLC檢測方案　
【4,4-二溴聯苯】
4,4-二溴聯苯系多溴聯苯類化合物，多溴聯苯（polybrominated biphenyls，簡稱PBBs），包括四溴代、五溴代、六溴代、八溴代、十溴代等209種(zhǒng)同系物，電子電器産品中含有的有毒有害物質可分爲鹵化物、重金屬及其他金屬、鋅硫化物、放射性物質四類，其中包括鉛Pb、汞Hg、镉Cd、六價鉻離子CrVI、多氯聯苯PCBs、多溴聯苯PBBs和多溴聯苯醚PBDEs等。多溴聯苯和多溴聯苯醚都(dōu)屬于溴化阻燃劑(brominated flame retandants,BFRs)，溴化阻燃劑是普遍使用的工業化學(xué)制劑,被(bèi)廣泛用于印刷電路闆、塑料、塗層、電線電纜及樹脂類電子元件中。

【性質】
CAS号: 92-86-4
英文名稱: 4,4"-Dibromobiphenyl
中文名稱: 4,4"-二溴聯苯
CBNumber: CB9392647
分子式: C12H8Br2
分子量: 312

【危害】
多溴聯苯也屬于持久性有機污染物（POPs）的一種(zhǒng)，它在環境中的殘留周期長(cháng)，難分解，不易揮發(fā)，易在生物以及人體脂肪中蓄積，對(duì)人體的主要危害爲影響免疫系統、緻癌、損害大腦及神經(jīng)組織等，光化學(xué)降解是環境中多溴聯苯的重要歸趨之一。

1、儀器與試劑
  1.1儀器、設備
  LC-10Tvp高效液相色譜儀
  Vertex 色譜柱：250mm×4.6mm×5μm
  分析天平
  針頭過(guò)濾器
  微孔濾膜：0.45µm
  1.2試劑
  甲醇（HPLC）
  磷酸二氫鉀（AR）
  磷酸氫二鈉（AR）
  純水

2、供試品溶液的制備
供試品溶液的制備 取該成(chéng)品，用濾膜過(guò)濾，上樣(yàng)分析

3、色譜條件
色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm
流動相：以甲醇爲流動相A，以緩沖溶液爲流動相B，按下表規定經(jīng)行梯度洗脫；
波長(cháng)：226nm
流速：1. 0 mL/min
時間（分鍾） 流動相A（%） 流動相B
0 93 7
15 93 7
15.1 100 0
25 100 0
4、測定法
分别精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得
5、譜圖

苯并（a）芘的高效液相色譜HPLC檢測方案

【苯并（a）芘】
苯并芘又稱苯并（a）芘， 也稱3，4-苯并芘，英文縮寫BaP，是一種(zhǒng)常見的高活性間接緻癌物和突變原。它是無色至淡黃色、針狀、晶體(純品)，不溶于水，微溶于乙醇、甲醇，溶于苯、甲苯、二甲苯、氯仿、乙醚、丙酮等，本品在工業上無生産和使用價值，一般隻作爲生産過(guò)程中形成(chéng)的副産物随廢氣排放。

【危害】
苯并（a）芘釋放到大氣中以後(hòu)，總是和大氣中各種(zhǒng)類型微粒所形成(chéng)的氣溶膠結合在一起(qǐ)，在8微米以下的可吸入塵粒中，吸入肺部的比率較高，經(jīng)呼吸道(dào)吸入肺部，進(jìn)入肺泡甚至血液，導緻肺癌和心血管疾病。 苯并（a）芘對(duì)實驗動物的半緻癌劑量爲80ug，緻癌劑量爲0.4-10ug，食品中的脂肪在高溫熱解時或膽固醇受熱作用均可生成(chéng)苯并芘，環境中苯并芘污染主要在加工環節的污染和工業廢水、廢氣的污染，特别是在采用橡膠管道(dào)輸送原料和成(chéng)品時，橡膠管道(dào)的苯并芘帶入食品。包裝用蠟紙，礦蠟中苯并芘的含量較高，食品加工機械用的潤滑油中的苯并芘含量高，也使食品受到一定量的污染。

【樣(yàng)品處理過(guò)程】
糧食、蔬菜、糕點類或水分少的食品：準确稱取5.5-10.0g粉碎過(guò)篩的樣(yàng)品，置于250ml具塞三角瓶，加入環己烷30ml，超聲震蕩20min，傾出上清液，殘渣兩(liǎng)次分别加入環己烷20ml，超聲震蕩20min。合并3次提取液于100ml分液漏鬥中，以環己烷飽和過(guò)的二甲基亞砜提取三次，每次10ml，振搖1min，靜置10min，合并二甲基亞砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，搖勻；待淨化；
植物油、飲料：确稱取1.0g的混勻樣(yàng)品，用環己烷40ml分次洗入250ml分液漏鬥中，以環己烷飽和過(guò)的二甲基亞砜提取三次，每次10ml，振搖1min，靜置10min，合并二甲基亞砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，搖勻；待淨化；
肉及其制品：準确稱取5.5-10.0g切碎混勻的樣(yàng)品，再用無水硫酸鈉攪拌（樣(yàng)品與無水硫酸鈉的比例爲1:1或1:2，如水過(guò)多則需在60℃左右先將(jiāng)樣(yàng)品烘幹），置于250ml具塞三角瓶，加入環己烷30ml，超聲震蕩20min，傾出上清液，殘渣兩(liǎng)次分别加入環己烷20ml，超聲震蕩20min。合并3次提取液于100ml分液漏鬥中，以環己烷飽和過(guò)的二甲基亞砜提取三次，每次10ml，振搖1min，靜置10min，合并二甲基亞砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，搖勻；待淨化；
淨化過(guò)程略；

【色譜條件】
色譜柱：C18, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
流動相:ACN:H2O=90:10
激發(fā)波長(cháng)：386nm   發(fā)射波長(cháng)：405nm
流速：1mL/min

【譜圖】

【儀器配置】

變壓器油中糠醛高效液相色譜HPLC檢測方案
-糠醛-
長(cháng)期以來，采用氣相色譜法檢測絕緣油中的CO、CO2和低炭烴類含量作爲判斷電氣設備固體絕緣材料老化程度或進(jìn)行故障分析的依據。但是實驗證明，絕緣油氧化分解也能(néng)産生絕緣紙老化、降解的特征産物CO和CO2，所以給正确判斷帶來了難度。
在充油電氣設備中，由于構成(chéng)固體絕緣的纖維質材料的老化導緻纖維素的分解而産生幾種(zhǒng)化合物，如糠醛和呋喃衍生物，呋喃衍生物太部分被(bèi)吸附在紙上，而小部分溶于油中。這(zhè)些物質的存在可以作爲運行設備固體絕緣老化程度的診斷依據，也可以作爲對(duì)溶解氣體分析的補充。1984年12屆國(guó)際大電網會議上，英國(guó)學(xué)者首先提出油中糠醛可作爲變壓器内絕緣紙老化的特征産物，檢測絕緣油中的糠醛含量，可以判斷電氣體絕緣材料劣化程度。根據中華人民共和國(guó)電力行業标準《電力設備預防性試驗規程》，當變壓器油中的糠醛含量達到4mg/L時，可以認爲變壓器絕緣老化已經(jīng)比較嚴重。測量糠醛時取樣(yàng)簡單方便，打開(kāi)變壓器油箱下方閥門即可，無須設備停運。
關于液相色譜法檢測變壓器油中的糠醛，已有一些相關報道(dào)。但是他們所采用的方法耗時較長(cháng)，不符合電力部門快速檢測和應急處理的要求。并且他們采用的是國(guó)外進(jìn)口儀器，價格昂貴。
賽智科技利用全新高性能(néng)的LC-10Tvp高效液相色譜儀，經(jīng)實踐檢測可提供變壓器油中糠醛含量的HPLC檢測方案，得出的結果準确可靠，檢出限好(hǎo)，适用于變壓器油中糠醛含量的測定，僅供廣大用戶參考。
1、儀器與試劑
1.1儀器、設備
LC-10Tvp高效液相色譜儀；
Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm；
離心機；
5ml移液器；
振蕩器。
針頭過(guò)濾器
微孔濾膜：0.45µm
1.2試劑
甲醇：色譜純。
糠醛标準物質。
純水

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備
對(duì)照品溶液的制備 精确量取10uL糠醛，加入1000mL容量瓶中，用甲醇定容至1000mL。該标準儲備液的濃度爲10μL/L。
供試品溶液的制備 量取5mL變壓器油置于10mL離心管中，加入5mL甲醇，用旋渦混合器振蕩混合5min後(hòu)，4000r/min離心10min。取上層甲醇溶液進(jìn)樣(yàng)檢測。

3、色譜條件
色譜柱：RPCN18, 4. 6x250 mm，粒度5 µm
流動相：以甲醇爲流動相A，以純水爲流動相B，按下表規定經(jīng)行梯度洗脫；
波長(cháng)：280nm
流速：0.8 mL/min

 
4、測定法
分别精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得
 
5、結果分析
   配制濃度分别爲：0.1μL/L，0.5μg/mL，1μL/L，10μL/的糠醛标樣(yàng)溶液，依次進(jìn)樣(yàng)檢測，測得R＝0.9999，線性方程爲y=15.62122X+7.17653e-4，在0.1μL/L～10μL/L範圍内線性良好(hǎo)。本方法中，參照3倍的信噪比爲檢出限，可以達到0.05ul/l，符合一般的産品檢測要求，同時适合電力部門作爲判斷電氣設備固體絕緣材料老化程度或進(jìn)行故障分析的依據。

 
圖譜
 
 

中華人民共和國(guó)農業部公告第1849号公布 《飼料生産企業許可條件》，自2012年12月1日起(qǐ)施行，其中第二十一條明确規定：

（一）除配備常規檢驗儀器外，還(hái)應當配備下列專用檢驗儀器：

1.固态維生素預混合飼料生産企業配備萬分之一分析天平、高效液相色譜儀（配備紫外檢測器）、恒溫幹燥箱、樣(yàng)品粉碎機、标準篩；

2.液态維生素預混合飼料生産企業配備萬分之一分析天平、高效液相色譜儀（配備紫外檢測器）、酸度計；

3.微量元素預混合飼料生産企業配備萬分之一分析天平、原子吸收分光光度計（配備火焰原子化器和被(bèi)測項目的元素燈）、恒溫幹燥箱、樣(yàng)品粉碎機、标準篩；

4.複合預混合飼料生産企業配備萬分之一分析天平、高效液相色譜儀（配備紫外檢測器）、原子吸收分光光度計（配備火焰原子化器和被(bèi)測項目的元素燈）、恒溫幹燥箱、高溫爐、樣(yàng)品粉碎機、标準篩。

（二）檢驗化驗室應當包括天平室、前處理室、儀器室和留樣(yàng)觀察室等功能(néng)室，使用面(miàn)積應當滿足儀器、設備、設施布局和檢驗化驗工作需要：

1.天平室有滿足分析天平放置要求的天平台；

2.前處理室有能(néng)夠滿足樣(yàng)品前處理和檢驗要求的通風櫃、實驗台、器皿櫃、試劑櫃、氣瓶櫃或氣瓶固定裝置以及避光、空調等設備設施；同時開(kāi)展高溫或明火操作和易燃試劑操作的，應當分别設立獨立的操作區和通風櫃；

3.儀器室滿足高效液相色譜儀、原子吸收分光光度計等儀器的使用要求，高效液相色譜儀和原子吸收分光光度計應當分室存放；

4.留樣(yàng)觀察室有滿足原料和産品貯存要求的樣(yàng)品櫃。

【黃曲黴毒素】
黃曲黴毒素是主要由黃曲黴 （aspergillus flavus）寄生曲黴 （a.parasiticus）産生的次生代謝産物，在濕熱地區食品和飼料中出現黃曲黴毒素的機率高。B1 、B2和G1、G2，就是經(jīng)常經(jīng)常出現在農産品中的黃曲黴毒素的代表，毒性強的排行“B1”，B表示藍色，因爲它在紫外光的照射下會發(fā)出藍色熒光。除了親兄弟B2之外，它還(hái)有堂兄弟G1和G2，因爲在紫外光下發(fā)射黃綠色熒光而得名。
黃曲黴毒素在農産品中幾乎無法避免，不想餓死的人類也隻好(hǎo)無奈地吃下一些。世界各國(guó)，都(dōu)隻能(néng)設定一個“限量标準”。不超過(guò)那個标準，危害就小到可以忽略了。它們存在于土壤、動植物、各種(zhǒng)堅果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油産品，當人攝入量大時，可發(fā)生急性中毒，出現急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入，可造成(chéng)慢性中毒，生長(cháng)障礙，引起(qǐ)纖維性病變，緻使纖維組織增生。AFT的緻癌力也居首位，是目前已知強緻癌物之一。
由于黃曲黴毒素在水溶液中會發(fā)生熒光淬滅，反相色譜中B1和G1兩(liǎng)種(zhǒng)異構體熒光強度很弱，需要進(jìn)行衍生化。衍生化的方法一般有柱前和柱後(hòu)兩(liǎng)類，我國(guó)藥典在測定黃曲黴毒素時采用碘柱後(hòu)衍生法。

【樣(yàng)品處理過(guò)程】
中藥：取供試品粉末15g（過(guò)二号篩），精密稱定，加入氯化鈉3g，置于均質瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速攪拌2min（攪拌速度大于11000r/min），離心5min（離心速度大于2500r/min），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45um）濾過(guò)，量取續濾液20ml，待淨化；
大米：取樣(yàng)品25g，加入5g氯化鈉與125ml提取液（70%甲醇-水溶液）混勻，劇烈振蕩20min，用快速定性濾紙過(guò)濾，收集濾液；取10ml濾液加入20ml蒸餾水稀釋，過(guò)濾，收集濾液作爲上樣(yàng)液，取15ml該溶液待淨化；
植物油：取樣(yàng)品25g，加入125ml提取液（80%乙腈-水溶液）混勻，劇烈振蕩20min，用快速定性濾紙過(guò)濾，收集濾液；取10ml濾液加入40ml蒸餾水稀釋，過(guò)濾，收集濾液作爲上樣(yàng)液，取25ml該溶液待淨化；
淨化過(guò)程需用到黃曲黴免疫親和柱，淨化過(guò)程略。

【色譜條件】
色譜柱：C18, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
流動相:甲醇-乙腈-水=40:18:42
流動相B:將(jiāng)2.2g一水庚烷磺酸鈉與6.8g磷酸二氫鉀溶于500ml水中，與500ml甲醇混合，PH=3.5；兩(liǎng)相混合梯度脫洗；
波長(cháng)：λex=360nm     λem=450nm
流速：0.8 mL/min
衍生溶液爲0.05%的碘溶液，衍生泵：0.3ml/min, 衍生溫度：70℃